D-Димер ACCENT-200 D-DIMER

Документация: 

ACCENT-200_D-DIMER_r.pdf

ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ НАБОР ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ Д-ДИМЕРА

ПДФ (продукты деградации фибрина и фибриногена) - общее название некоторых продуктов деградации, которые образуются в результате опосредованной плазмином протеолитической деградации фибрина и фибриногена. Исследование ПДФ является важным тестом для диагностики или мониторинга фибринолитических нарушений, в особенности диссиминирующего внутрисосудистого свертывания (ДВС синдром).

Определение ПДФ обнаруживает также продукты деградации фибриногенолиза, в то время как определение Д-димера является более специфичным для фибринолиза, и лишь Д-димер может образовываться в результате опосредованной плазмином протеолитической деградации фибрина.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Данный метод анализа Д-димера является турбидиметрическим с использованием латексных частиц с иммобилизованными на их поверхности антителами против Д-димера; в присутствии антигена происходит агглютинация частиц латекса с образованием больших агрегатов и увеличением рассеивания света. Увеличение рассеивания света пропорционально количеству Д-димера в образце.

РЕАГЕНТЫ

Состав набора:

1. 1-Reagent 1 x 21 мл
2. 2-Reagent 1 x 7 мл
3. D-Dimer Diluent 2 x 40 мл

Буфер (1-Reagent), латекс (2-Reagent) и D-Dimer Diluent при 2-10°C сохраняют стабильность в течение всего срока годности, указанного на упаковке. После вскрытия флакона реагенты должны быть использованы в течение 1 месяца. Не замораживать.

Концентрации компонентов в реагентах:

• Трис(гидроксиметило)аминометан 0,38 моль/л
• суспензия латексных частиц, покрытых мышиными антителами к Д-димеру 0,2 %
• азид натрия < 1 г/л

Предупреждения и замечания:

• Использовать только для диагностики in vitro.
• Реагенты должны использоваться только в целях, для которых они предназначены, квалифицированным лабораторным персоналом в соответствующих лабораторных условиях.
• Продукты человеческого происхождения протестированы на присутствие антигена вируса гепатита В (HBsAg) и антител к ВИЧ, HCV и оказались нереактивными. Однако, с материалом следует обращаться, как с потенциально способным переносить инфекционные заболевания.
• Реагенты содержат азид натрия (< 1 г/л) в качестве консерванта. Избегать контакта с кожей и слизистыми оболочками! Азид натрия может взаимодействовать со свинцовыми и медными трубами водопровода и канализации, образуя взрывоопасные азиды металлов. Реагент и реакционную смесь при попадании в сточные трубы, следует смыть большим количеством воды для предотвращения образования азидов.
• Перед использованием необходимо уравновесить температуру реагентов с комнатной.
• Латексный реагент (2-Reagent) перед использованием нужно хорошо перемешать.
• Нельзя смешивать реагенты из наборов с разными лотами.
• Нельзя добавлять новый реагент в остатки раствора.
• Следует обратить внимание на чистоту кювет, в которых не должно быть пыли и следов детергентов.
• Диапазон линейности зависит от типа автоматического анализатора.
• Иногда в буфере (1-Reagent) появляются примеси, которые не влияют на результат пределений.
• Иммунный анализ не может предотвратить неспецифическую реакцию, поэтому в редких случаях встречается эффект прозоны в случае необычно высокой концентрации Д-димера в исследуемом образце.

БИОЛОГИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ

1. Плазма: Девять объемов свежей крови разводят одним объемом 0,11M цитрата трехзамещенного натрия, затем центрифугируют при 3000 x g в течение 10-30 минут. Для анализа в качестве плазмы следует использовать супернатант.

2. Сыворотка: Свежую кровь собирают с помощью вакуумной пробирки с антикоагулянтом, затем центрифугируют. Образцы, содержащие более чем 20 мкг/мл Д-димера, следует проанализировать еще раз, используя разведение образца 1:10 реактивом D-Dimer Diluent.

В случае, если определения производятся более, чем по истечению 8 часов после забора крови и сепарации сыворотки или плазмы, образцы следует поместить в холодильник (могут храниться охлажденными до 4 дней). По истечению этого срока, образцы могут быть заморожены на срок до 2 месяцев. Тем не менее рекомендуется производить исследования на свежевзятом биологическом материале!

ПРОЦЕДУРА ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Эти реагенты предназначены для использования в автоматических анализаторах ACCENT-200 и ACCENT-200 II GEN.

1-Reagent и 2-Reagent готовы к использованию.

В качестве бланк-реагента рекомендуется использовать 0,9% NaCl.

УСТАНОВКА ПАРАМЕТРОВ для ACCENT-200 и ACCENT-200 II GEN

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Для внутреннего контроля качества рекомендуется использовать контрольные сыворотки CORMAY D-DIMER CONTROLS (Кат.№ 4-459) для каждой серии измерений.

Для калибровки автоматических анализаторов рекомендуется использовать CORMAY D-DIMER CALIBRATOR (Кат.№ 4-259). В качестве 0-калибратора рекомендуется использовать 0,9% NaCl.

Калибровочную кривую следует составлять каждые 28 дней, при каждой смене лота реагента или в случае необходимости, напр., если результаты контроля качества не попадают в референтный диапазон.

ХАРАКТЕРИСТИКИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Эти метрологические характеристики были получены при использовании автоматических анализаторов TBA80FR и BS-400. Результаты, полученные на других анализаторах, могут отличаться.

• Чувствительность: 0,3 мкг/мл.
• Линейность: до 20 мкг/мл. Для более высоких концентраций следует развести образец реактивом D-Dimer Diluent в отношении 1:10 и повторить анализ. Умножить результат на 11.
• Специфичность / Интерференции: Гемоглобин до 4600 мг/дл, общий билирубин до 19,6 мг/дл, фетальный билирубин до 18,4 мг/дл, РФ до 500 МЕ/мл не влияют на результаты определений.
• Точность
  

  Повторяемость (между сериями) n = 10	Среднее [мкг/мл]	SD [мкг/мл]	CV [%]
  уровень 1	1,49	0,079	5,3
  уровень 2	5,73	0,125	2,2

  Воспроизводимость (изо дня в день) n = 80	Среднее [мкг/мл]	SD [мкг/мл]	CV [%]
  уровень 1	2,60	0,11	4,38
  уровень 2	8,99	0,48	5,36

• Сравнение метода
  Сравнение между реагентом CORMAY (y) и коммерчески доступным тестом на основе турбидиметрического метода с латексом (x) для 54 образцов дало следующие результаты:
  y = 0,991x + 0,028 мкг/мл;
  R = 0,9989 (R - коэффициент корреляции)

ЛИТЕРАТУРА

1. Alan H. B. Wu, Tietz Clinical Guide to Laboratory Tests, W.B. Saunders Company, 4th edition, 482 (2006).